PCR metoda (lančana reakcija polimeraze) je "zlatni standard" moderne DNA dijagnostike, vrlo osjetljiva metoda molekularne biologije. PCR metoda se koristi u medicini, genetici, kriminologiji i drugim područjima. Često se i uspješno koristi u dijagnozi mnogih zaraznih bolesti.
Dijagnoza zaraznih bolesti PCR-om
PCR test omogućuje otkrivanje ne samo samog patogena, već i jednog fragmenta stranih DNA u ispitivanom materijalu. Istraženi (biološki) materijali su: venska krv, epitelne stanice i tajna genitalnog trakta, sperma, sline, sputuma i drugih bioloških izlučevina. Potrebni biološki materijal određen je navodnom bolesti.
PCR metoda u naše vrijeme, naravno, snažan je dijagnostički alat. Možda je jedini nedostatak studije njegova visoka cijena.
Na popisu bolesti, čija se prisutnost može odrediti PCR metodom:
- virusna i bakterijska upala pluća;
- tuberkuloze;
- ospice, rubeole, parotitis;
- zarazni hepatitis svih oblika;
- salmoneloza, difterija;
- Helikobakterija i bolesti uzrokovane crijevnim infekcijama;
- STD (spolno prenosive bolesti): gonoreja, klamidija, ureaplasmoza, sifilis, AIDS, genitalni herpes, gardnerellez i drugi.
STI probira pomoću PCR metode
Za razliku od tradicionalnih analiza, PCR tehnika omogućuje otkrivanje spolno prenosivih infekcija (STI) čak i ako su njihovi simptomi potpuno odsutni. Za prikupljanje biološkog materijala, žene su pročišćene epitelne stanice cervikalnog kanala, muškarca - struganje uretre. Ako je potrebno, PCR metoda provodi studiju venske krvi.
Dakle, STI test pomoću PCR metode omogućuje identifikaciju:
- virus humane imunodeficijencije (HIV);
- blijedi treponemus (uzročnik sifilisa);
- Herpes simplex virus i citomegalovirus;
- human papilomavirus (HPV);
- klamidija, toksoplazma, mikoplazme, ureaplazme i druge seksualne infekcije.
Ako se PCR analiza izvodi ispravno, vjerojatnost lažnih pozitivnih rezultata isključena je. Osim toga, treba spomenuti ljudski papilomavirus (HPV) i važnost PCR metode za njegovu dijagnozu. Nasuprot onkocitološkom razmaku, PCR metoda može odrediti specifičnu vrstu HPV-a, osobito onkogene tipove 16 i 18, čija prisutnost ugrožava ženu s tako ozbiljnom i često smrtonosnom bolešću kao što je rak vrata maternice . Pravovremeno otkrivanje onkogenih tipova HPV-a putem PCR metode često pruža priliku za sprečavanje razvoja raka vrata maternice.
Analiza imunoenzimske analize (ELISA) i lančana reakcija polimeraze (PCR): plus i minus
Koja je dijagnostička metoda bolja: PCR ili ELISA? Točan odgovor na ovo pitanje ne postoji, budući da je u biti dijagnoza pomoću ove dvije studije ima različite svrhe. I češće se metode IFA i PTSR primjenjuju u kompleksu.
PCR test je neophodan za određivanje specifičnog uzročnika infekcije, može se otkriti odmah nakon infekcije, unatoč odsutnosti simptomatske manifestacije bolesti. Ova metoda je idealna za otkrivanje skrivenih i kroničnih bakterijskih i virusnih infekcija.
Za razliku od PCR tehnike, ELISA metoda je dizajnirana za otkrivanje ne uzročnika infekcije, nego na imunološki odgovor organizma, tj. Za otkrivanje prisutnosti i količine protutijela određenom patogenu. Ovisno o vrsti otkrivenih antitijela (IgM, IgA, IgG), može se odrediti stupanj razvoja zaraznog procesa.
Obje metode i PCR i ELISA imaju visoku pouzdanost (100 i 90%). No, važno je napomenuti činjenicu da analiza ELISA-e u nekim slučajevima daje pogrešnu pozitivnu (ako je neka osoba bolestana nekom bolešću u prošlosti) ili lažno negativno (ako je infekcija prošla relativno nedavno).